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    《中华中医药学会糖尿病分会2016年学术年会暨第十七次中医糖尿病大会论文汇编》2016年
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    磷酸戊糖途径在糖尿病视网膜病变中的作用及机制研究

    杨晨  刘素嬛  杨叔禹  
    【摘要】:目的糖尿病视网膜病变是糖尿病常见的微血管病变之一,也是发达国家引起成年人致盲的重要原因,DR的发生发展是个多细胞病变、多机制调控的过程。目前,糖网的发病机制并不完全明确,比较公认的机制有:炎症、糖基化终末产物积聚,蛋白激酶C(PKC)的活化和氧化应激等通路,现在也有观点认为氧化应激是其他通路的最终通路。NADPH是细胞内维持还原系统活性的重要物质,细胞内约60%的NADPH来源于PPP,NADPH主要通过PPP的关键酶G6PD和PGD催化底物的过程中产生。大多数文献认为NADPH维持抗氧化系统活性,NADPH不足会导致整个抗氧化系统的崩溃,及氧化应激的产生。也有文献报道NADPH氧化酶是ROS的主要来源,NADPH的增多会引起ROS的产生。目前并没有人探索DR中PPP来源的NADPH的作用,本课题旨在探索NADPH在一型糖尿病视网膜病变中的作用,为临床治疗提供新思路。方法本课题结合STZ诱导1型糖尿病SD大鼠模型和926细胞缺氧诱导模型,采用FITC尾静脉注射观察糖尿病视网膜的渗漏,视网膜铺片染色计算周细胞丢失。体外运用CCK-8检测926细胞的活力,Western Blot检测磷酸戊糖途径关键酶的蛋白表达,QPCR检测G6PD mRNA的表达量。NADP/NADPH试剂盒OD450nm检测细胞NADPH含量。结果从体内试验来看,12周糖尿病大鼠已发生糖尿病视网膜病变,糖尿病视网膜组织G6PG mRNA表达量下降,体外实验926和HREC在400uMcocl2刺激下细胞活力显著下降,G6PD的蛋白表达量无明显变化,而NADPH的产量却又明显下降。结论从体内实验和体外实验结果来看,预测G6PD在体内视网膜高糖环境或者体外coc12模拟缺氧环境应该是受到抑制的,具体到G6PD的活性变化及作用尚需后续实验继续证明。
    【作者单位】:厦门市糖尿病研究所
    【分类号】:R587.2;R774.1

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